Proteintests
Vergleich der verschiedenen Proteintests:
Die allgemein üblichen Methoden für Proteintests sind:
- ASTM D5712–95 und 9
- 2 RRIM, eine modifizierte Lowry-Method
- EN455 Teil 3–94 und 00
- ISO/DIS 12243
Die entscheidenden Unterschiede der Methoden:
# | Verfahren | ASTM | RRIM | EN455 | ISO |
---|---|---|---|---|---|
1 | Extraktion | 1 Handschuh in kleine Stücke geschnitten (0,025M, pH7,4) bei 25°C für 2 Stunden in PBS eingelegt
| Kleine Stücke (0,01M, ph 7,4) bei 23°C für 3 Stunden in PBS eingelegt | 2 Handschuhe (ineinander gesteckt), TEX (0,1M, pH7,4) bei 25°C für 2 Stunden eingelegt | Kleine Stücke (0,01M, pH7,4) bei 25°C für 2 Stunden in PBS eingelegt |
2 | Fällung | Verwendung von DOC 0,15%, TCA 72%, PTA 2% | Verwendung von TCA 35% und PTA 1,6% | Verwendung von DOC 0,15%, TCA 72%, PTA 72% | Verwendung von DOC 0,15%, TCA 72%, PTA 72% |
Erneute Lösung/ Konzentration | 0,35-1ml von 0,20M NaOH | 1-6ml von 0,2 M NaOH | 0,20-1ml von 0,10M NaOH | 0,80-4,0ml von 0,20 M NaOh | |
3 | Lowry-Test | Einsatz von basischem Kupferzitrat & Folin 50% | Einsatz von basischem Kupferzitrat & Folin 72% | Bio-Rad DC Protein-Testset 1 | Basisches Kupferzitrat & Folin 72% |
Farbentwicklung | 15+30min | 10+30min | 30min | 15min | |
Kalibrierungs-standard | Ovalbumin Lösung | BSA-Lösungen | Ovalbumin Lösung | Ovalbumin Lösung |
Key
- PBS - Phosophatgepufferte Kochsalzlösung
- TES - Heminatriumsalz, N-Tris-[Hydroxymethyl]-Methyl-2-Aminoethan-Sulfonsäure
- TCA - Trichloressigsäure
- PTA - Phosphorwolframsäure
- DOC - Natriumdeoxycholat
- NaOH - Natriumhydroxid
- BSA - Bovinserum Albumin